马里奥（克里斯·帕拉特 Chris Pratt 配音）和路易吉（查理·戴 Charlie Day 饰）是生活在布鲁克林的两名水管工，他们刚刚成立了自己的小公司，但很显然，他们的家人并不彻底支持兄弟两人的这份工作。某日，在工作中，马里奥和路易吉被水管吸入到了一个斑驳陆离的世界之中，两人在旅途中被迫分隔，马里奥来到了由桃花公主（安雅·泰勒-乔伊 Anya Taylor-Joy 配音）控制的蘑菇国，而路易吉则不幸的被传送到了由酷霸王（杰克·布莱克 Jack Black 配音）控制的库巴国。