影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）携手蜘蛛格温（海莉·斯坦菲尔德 Hailee Steinfeld 配音），穿越多元世界踏上更庞大的冒险征途的故事。面对每个蜘蛛侠都会失掉至亲的宿命，迈尔斯誓言打破命运魔咒，找到归于自己的英豪之路。而这个决议和蜘蛛侠2099（奥斯卡·伊萨克 Oscar Is aac 配音）所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突，一场以一敌百的蜘蛛侠大内战行将拉响！